На выставке представлены свыше 500 экспонатов – портретов и живописных полотен, артефактов, мемориальных предметов, архивных документов и фотографий из ведущих государственных музеев и архивов России.

Экспозиция в хронологическом порядке раскрывает основные этапы жизненного пути Императрицы: от детских лет, проведённых в замке Хайлигенберг в Югенхайме, до военно-политических событий Крымской и Русско-турецкой войн, во время которых под покровительством Императрицы было создано Общество попечения о раненых и больных воинах. При августейшем покровительстве создавались новые общины сестёр милосердия, происходило обучение среднего медицинского персонала и внедрение системы перевозки раненых с помощью санитарных поездов.

В экспозиции рассказывается о развитии женского образования в России, о значимых реформах, проведенных Императрицей Марией Александровной в этой области. Большое внимание уделено императорской семье – от династических связей до воспитания наследников, императорским «парадным резиденциям», в которых она проживала и способствовала их благоукрашению – Царское Село, Петергоф, Аничков и Зимний дворцы, крымское имение Ливадия и подмосковное имение Ильинское-Усово.

В экспозицию также включены личные вещи Императрицы, письма, фотографии, уникальные артефакты, связанные с миссионерской деятельностью Императрицы Марии Александровны на Святой Земле и на Балканах, на Балтике, на Кавказе и в Сибири, а также с созданием первого в России Попечительства Императрицы Марии Александровны о слепых.